奧林巴斯熒光顯微鏡的持點(diǎn)
奧林巴斯熒光顯微鏡是普通顯微術(shù)的重大發(fā)展。它具有*的*性。熒光顯微術(shù)是在黑閱內(nèi)背景下觀察標(biāo)‘杠的形色圖象,有良好的反劉,故觀察清楚、方便,易哥:鑒別,眼睛也不員疲勞。由于熒光染色素的濃度極?。▋x1:Iooo00)便能發(fā)出明亮的熒光,因此一般油機(jī)體眾說是無動的,為活體觀察,如研究功能器官的過程和細(xì)微糾構(gòu),某些代謝過程的變化等,提供了廣泛的可能性。另外,英光色素染色法比較簡軋時(shí)間路標(biāo)木制作客只,特別適于快速工億如傳染病的快速診斷等。
(1)奧林巴斯熒光顯微鏡可用明視場改暗視場方洗但”—般用睹權(quán)場效果較好,因?yàn)樗a(chǎn)生的現(xiàn)場背景是黑的,圖象反襯強(qiáng),;十;?立沒有明視場方便。至于透射熒光還是反射熒光,一般來說,反射熒光應(yīng)用范圍廣一以它不僅適用觀察普通標(biāo)刺;,而且還能現(xiàn)察不適明標(biāo)本。
奧林巴斯熒光顯微鏡根據(jù)激發(fā)光波長的特點(diǎn),熒光顯微術(shù)可用紫外光或紫藍(lán)光激發(fā)。蒙外光的特點(diǎn)在1:i4觀察機(jī)體組織的自體熒光<如核酸及金剛石等)在組織華工d:中便于區(qū)別背景熒光和染色目標(biāo)的熒光。但陜點(diǎn)是:常常會引起標(biāo)4;熒光的光致淬滅,標(biāo)本難以重復(fù)觀察,并且沙顯微攝影發(fā)生團(tuán)難。另外對活體標(biāo)本有叨顯的殺傷作用,對長期從事這項(xiàng)工作人員的暇睛也有傷害。特別是對絕大多數(shù)的熒光色素來說,紫外區(qū)不是zui大的光譜吸收風(fēng)因而不能得到先分的激發(fā)。而紫藍(lán)光卻沒有以上—些缺點(diǎn),但不足的是不能激發(fā)組織的自體熒光,因此不適于研究組織的白體熒光結(jié)構(gòu)。對于個(gè)別焚光色素,知羅達(dá)明R200,可用波長更長的藍(lán)綠光作為激發(fā)光為依。
(2)奧林巴斯熒光顯微鏡所觀察的熒光圖象,主要以兩個(gè)指標(biāo)判斷結(jié)果,一是形態(tài)學(xué)特征,二是熒光的亮度。在免疫焚光工作巾,尤其是這樣,必須將兩者結(jié)合起來綜合判斷不可偏皮。糾果記錄是根據(jù)主觀指標(biāo)或客觀指標(biāo),但一般常是憑工作者日力觀察的主觀指標(biāo)由于這是定性的觀察,所以記錄的度較差。隨著科學(xué)校木的發(fā)展,采用客觀指標(biāo)記錄結(jié)果巳開始應(yīng)用。
1、用不同序度的中性濾片‘插入激發(fā)濾片和標(biāo)本之間的光路中,以看焚光減駒的極度;
2、不同標(biāo)本以相同的隕光時(shí)間進(jìn)行顯檄攝影,然后用光密度計(jì)測定膠卷圖象;
3、直接用熒光計(jì)測熒光色素和兔疫熒光染色的鏡下標(biāo)本,
4、用光敏電池漏光表Z;愧網(wǎng)象的亮度,或者與掃描裝置結(jié)備對視場的特定部位進(jìn)行掃描等,如熒光顯微光度計(jì)。
奧林巴斯熒光顯微鏡對于觀察透明度差的標(biāo)本,以及各種活體組織時(shí),需采用反射光熒光裝置。其反射光熒光裝置的特點(diǎn)是:從光源來的混合光射到干涉分光濾鏡后,波長短的部分(榮外和紫藍(lán))由于濾鏡上鍍膜的性質(zhì)而反射,當(dāng)濾鏡對向光源呈45。傾斜時(shí),則垂直射向物鏡,’經(jīng)物鏡射向標(biāo)久使標(biāo)本受到激發(fā),這時(shí)物鎮(zhèn)直接起看聚光器的作用,同時(shí)波長氏的部分(綠、黃、紅等)能透過濾鏡比因此不向物鏡方向反射,濾鏡起到了激發(fā)濾板的作用,由于標(biāo)本的熒光是處在可見光長波區(qū);故對濾鏡也是可以透過的,因此能透射到目鏡以供觀察。根拇所需要激發(fā)光不同,干涉分光濫鏡可以更換。
備注:奧林巴斯熒光顯微鏡的持點(diǎn)部分文章由http://www.cnnoptics.com/,編輯上傳。
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