徠卡共聚焦顯微鏡的類型
在徠卡共聚焦顯微鏡中,是用相對十樣品掃描的聚焦光束照射樣品。要實現(xiàn)這種婦描,可以移動光束,也可以移動樣品本身。市面上的大多數(shù)顯微鏡都是移動光束的。
徠卡共聚焦顯微鏡中zui常用的兩種方法是用goIvo鏡式掃描器進行X、Y軸方向的掃描.或象在華聯(lián)掃描顯微鏡中那樣甩尼普科夫打拙盤。8alv。鏡可以足共振型的,以定的頻率快速振蕩;更常用的是反饋型的,以1kHz納頻率掃描。尼普利夫掃描盤.有一個帶一誹小孔的旋轉(zhuǎn)圓盤,因為他們侖客個光扎,pJ增白色光源。其之要缺點是信號強度低,必須用電視攝像機以產(chǎn)生電信號。共他可供選擇的光束掃描系統(tǒng)有;多面鏡掃擁器,其掃描速度快,但難以同步;光聲掃描儀、它有Tv的掃描速率,但內(nèi)存在色差,而不能應(yīng)用于熒光顯微術(shù),除非采用特殊的光路系統(tǒng)。
動樣式(移動樣品)、
徠卡共聚焦顯微鏡中掃描過程中,光學(xué)系統(tǒng)*1;變,所以整個視野中成像件能均一。相反,對于動光式掃描系統(tǒng),視野中亮度不一,視野邊緣的分辨率會F降,而且視野會產(chǎn)生明顯的彎曲。所以定量研究或圖像定建時,人們愛用動樣式掃描法。動樣式掃描法的缺點是,成fe過程相當(dāng)侵。記錄一幀圖像就可能要用幾秒鐘,用電子探針就更難了。當(dāng)要得到低噪音的圖像而必須延長掃描時間時,掃描速度問題就不太重要了。
zui后應(yīng)考慮到的掃描方法是物鏡的機械掃描。同樣,其優(yōu)點是,光線“在軸”謅過光路系統(tǒng),圖像質(zhì)垣較好;其缺點也是速度相當(dāng)慢。動光式徠卡共聚焦顯微鏡中還可選用許多組合。通??梢栽谖镧R前放一只或一組透鏡,以格光線會聚到物鏡上。為了使光束照亮物鏡的整個光7L,掃描鏡的旋轉(zhuǎn)軸應(yīng)該和目鏡的入射孔平面挨得很近。zui簡單的方法是,在目鏡入射孔旁邊放一塊在xY平面內(nèi)移動的平面鏡。另外,也可以把兩塊分立的8alvo鏡和焦闌系統(tǒng)聯(lián)合使用。zui后還有—‘種,是用兩塊密切偶合的galvo鏡,有時將其中一鏡的旋轉(zhuǎn)軸偏置,以使它既可平動又可轉(zhuǎn)動。
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